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Chip-seq實驗原理簡圖版

2025-08-08 18:08:01

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺

今天普拉特澤生物跟大家一起學習的是Chip-seq實驗原理簡圖版

ChIP-seq (Chromatin Immunoprecipitation Sequencing)是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的高通量測序技術(shù)。而普拉特澤生物——分子檢測平臺也非常重視這一點,為廣大科研人員提供Chip實驗外包服務(wù),同時也繪制了各種chip實驗流程圖片,分享給大家一起共勉!
聲明:以下圖片繪制均來源網(wǎng)絡(luò)~
ChIP-seq (Chromatin Immunoprecipitation Sequencing)它通常用于研究轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白修飾、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)等與基因表達調(diào)控相關(guān)的生物學問題。

ChIP-seq的基本原理是:利用特定的抗體將感興趣的蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的復(fù)合物進行免疫共沉淀,然后通過高通量測序技術(shù)對免疫共沉淀的DNA進行測序和分析,以確定蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的位置和數(shù)量。

具體步驟如下:

1.利用甲醛固定蛋白質(zhì)和DNA

將細胞或組織樣品與甲醛等交聯(lián)劑進行交聯(lián),使得蛋白質(zhì)與DNA之間形成穩(wěn)定的交聯(lián)復(fù)合物。

2.利用超聲波/限制性酶切割DNA

將交聯(lián)后的細胞或組織樣品進行裂解,使得蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物被釋放出來。

3.免疫共沉淀

使用特定的抗體對感興趣的蛋白質(zhì)進行免疫共沉淀,將與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段一同沉淀下來。

4.反交聯(lián)

將免疫共沉淀的樣品進行反交聯(lián),使得蛋白質(zhì)與DNA之間的交聯(lián)斷開,同時將DNA片段從蛋白質(zhì)中解離出來。

5.DNA純化

將反交聯(lián)后的DNA進行純化和富集,去除雜質(zhì)和不需要的DNA片段。

6.文庫構(gòu)建

將純化后的DNA片段進行文庫構(gòu)建,包括DNA片段的修飾、適配體的連接、PCR擴增等步驟。

7.高通量測序

對構(gòu)建好的文庫進行高通量測序,得到大量的短讀序列。

8.數(shù)據(jù)分析

對測序數(shù)據(jù)進行處理和分析,包括數(shù)據(jù)分析對測序數(shù)據(jù)進行處理和分析、序列比對、峰值識別、富集分析、差異分析等步驟,以及它們在基因表達調(diào)控中的功能和機制。

All in all,chip-seq技術(shù)的原理是通過免疫共沉淀和高通量測序技術(shù),對蛋白質(zhì)與DNA相互作用的復(fù)合物進行定位和分析,從而揭示基因表達調(diào)控的分子機制和生物學意義。

這是一項超適合轉(zhuǎn)錄因子研究的技術(shù)?。。?/span>


好,今天關(guān)于Chip-seq實驗原理簡圖

就說到這里

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