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   流式檢測細胞周期的注意事項由普拉特澤生物根據(jù)承接的幾千例流式檢測細胞周期實驗和各種實驗過程中的技術(shù)咨詢總結(jié)而來，普拉特澤生物專注提供線下生物實驗研究，積累了大量經(jīng)驗，為廣大科研工作者提流式檢測細胞周期等各類生物學(xué)實驗外包。

   那么今天的流式檢測細胞周期注意事項我們分為兩個方面為大家解讀：

   一、流式檢測細胞樣本的制備的注意事項

   1、根據(jù)不同的檢測細胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。

   2、培養(yǎng)細胞時，以對數(shù)期處理為宜，避免細胞量過少導(dǎo)致收集細胞量不足或者細胞量過多導(dǎo)致細胞開始大量死亡造成的實驗誤差。

   2、流式檢測細胞周期上機檢測所需收集細胞量較多，收集細胞時盡量多收集一些

   3、流式檢測對細胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作輕緩，避免過多地損傷、弄破細胞。

   4、本實驗對細胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作輕緩，避免過多地損傷細胞。

   5、細胞周期待測細胞盡量要獲得單個細胞，避免DNA的降解。

   6、樣本最關(guān)鍵的就是減少碎片(EDTA/不可過度吹打/離心rpm)。PI既能與DNA結(jié)合，又能與RNA結(jié)合，所以要用RNase降解。PI質(zhì)量及RNase所加量很重要，建議用商品化試劑。

   7、污染脫氧核糖核酸酶會降解DNA，故玻璃器皿和試劑要干凈滅菌。

   8、染液等物質(zhì)有一定毒性，注意防護。

   二、流式檢測時的注意事項：

   1、固定時必須預(yù)冷PBS重懸打入無水乙醇中，二者順序不可顛倒。

   2、固定后細胞雖然可以保存較長時間后再上機檢測，為避免不可控因素影響最好盡早上機檢測。

   3、進樣速度：一般檢測細胞濃度調(diào)整為2*10^5到2*10^6/mL，進樣速度為低速。若峰形較寬，可能就是進樣速度太快。

   4、儀器質(zhì)控定期做，盡可能排除因機器設(shè)置引起的峰形加寬。排除粘連細胞(FL2-A/FL2-W)。

   5、通過電壓脈沖信號的寬度和面積區(qū)別實體組織標(biāo)本中的粘連細胞群體，最大程度的減少粘連細胞帶來的假陽性結(jié)果。
   到這里，用流式檢測細胞周期操作過程中我們要注意的問題就講完了，學(xué)習(xí)流式檢測細胞周期實驗步驟可點擊此處跳轉(zhuǎn)，如果朋友們還有新的問題或要補充的注意事項可以隨時聯(lián)系我們的客服小姐姐補充交流學(xué)習(xí)哦。當(dāng)然如果您有細胞周期檢測等實驗外包的需求，普拉特澤隨時為您服務(wù)。