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        肝纖維化動(dòng)物造模操作步驟由普拉特澤生物動(dòng)物技術(shù)人員為大家總結(jié)分享。肝纖維化是肝臟受到損傷后細(xì)胞外基質(zhì)合成、降解與沉積不平衡的一種修復(fù)反應(yīng)，肝纖維化動(dòng)物模型的建立可以更好地幫助研究者了解分析肝纖維化的發(fā)病機(jī)制與研發(fā)臨床治療方法。普拉特澤生物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)長(zhǎng)期提供肝纖維化動(dòng)物模型外包服務(wù)，專業(yè)認(rèn)真。

        上期我們分享了肝纖維化動(dòng)物造模常用的四種方法，CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型、二甲基亞硝胺誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型、膽汁淤積誘導(dǎo)肝纖維化模型、營養(yǎng)型等其他肝纖維化模型，本文來詳細(xì)分享用CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的實(shí)驗(yàn)步驟。

        一、CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型實(shí)驗(yàn)步驟

        CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的造模機(jī)制：CCl4為一種選擇性肝毒性藥物，其進(jìn)入機(jī)體后在肝內(nèi)活化成自由基如三氯甲基自由基(CCl3)，后者可直接損傷質(zhì)膜，啟動(dòng)脂質(zhì)過氧化作用，破壞肝細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)等，造成肝細(xì)胞變性壞死和肝纖維化的形成。造模方法：大鼠：CCl4與橄欖油1:1比例混合均勻。小鼠：CCl4與橄欖油1:7比例混合均勻大鼠皮下、腹腔或口服給予配制好的造模劑，劑量為1-2ml/kg，每周2次，保證給藥時(shí)間間隔一致，持續(xù)6-8周即可出現(xiàn)肝臟的纖維化癥狀。

        1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、材料的準(zhǔn)備

        實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：

        8周齡，體重為230±20g左右的SD大鼠

        8周齡，體重為25±2g左右的C57Bl/6小鼠

        實(shí)驗(yàn)材料：CCl4、橄欖油（植物油）、注射器

        2、實(shí)驗(yàn)操作

        （1）試劑配制：大鼠：CCl4與橄欖油1:1比例混合均勻；小鼠：CCl4與橄欖油1:7比例混合均勻

        （2）  CCl4誘導(dǎo)大鼠皮下、腹腔或口服給予配制好的造模劑，劑量為1-2ml/kg，每周2次，保證給藥時(shí)間間隔一致，持續(xù)6-8周即可出現(xiàn)肝臟的纖維化癥狀。

        （3）觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的病理變化位置：中心葉或門靜脈區(qū)。

        （4）CCl4易揮發(fā)，最好配置當(dāng)天使用。在進(jìn)行正式試驗(yàn)之前最好進(jìn)行一次預(yù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證所選的動(dòng)物及造模時(shí)間是否符合預(yù)期。

        二、二甲基亞硝胺誘（DMN）導(dǎo)肝纖維化模型實(shí)驗(yàn)步驟

        二甲基亞硝胺誘導(dǎo)肝纖維化模型造模機(jī)制：NDMA是一種致癌物，大劑量使用，NDMA進(jìn)入肝細(xì)胞經(jīng)微粒體代謝生成乙醛，后者引起肝細(xì)胞損害，肝壞死和肝纖維化。

        1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、材料準(zhǔn)備

        實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：8周齡，SD大鼠，體重230±20g左右

        實(shí)驗(yàn)材料：DMN，生理鹽水

        2、實(shí)驗(yàn)操作

        （1）試劑配制：稱量一定量的DNN，使用生理鹽水按照10mg/kg的劑量進(jìn)行配制。

        （2）3次/周腹腔注射，連續(xù)給藥大于4周，檢測(cè)相關(guān)肝臟損傷和纖維化指標(biāo)以便判斷纖維化是否發(fā)生。

        （3）觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病理變化位置：匯管區(qū)纖維化（中央門靜脈區(qū)）

        （4）實(shí)際的操作中我們要注意：給藥方式理論上是每周給藥三次，但要根據(jù)實(shí)際動(dòng)物狀態(tài)，調(diào)整給藥的頻率，適當(dāng)?shù)臏p少或者增加，若減少頻率需增加給藥時(shí)間，增加給藥頻率可適當(dāng)減少給藥時(shí)間，但一般都要持續(xù)4周。

        好啦，那關(guān)于肝纖維化動(dòng)物模型的CCl4和二甲基亞硝胺誘導(dǎo)肝纖維化動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)步驟就講完啦，如果您對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟有任何建議或疑問可以隨時(shí)留言給客服，技術(shù)會(huì)及時(shí)給到解答的，如果您有肝纖維化動(dòng)物造模實(shí)驗(yàn)外包的需求，歡迎選擇普拉特澤生物~