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糖尿病動(dòng)物模型造模步驟【糖尿病動(dòng)物造模外包】

糖尿病動(dòng)物造模實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物技術(shù)為大家總結(jié)分享，糖尿病是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用而導(dǎo)致的慢性全身性疾病，糖尿病動(dòng)物模型是研究糖尿病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的關(guān)鍵手段。普拉特澤生物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)長(zhǎng)期承接糖尿病動(dòng)物模型的外包代做，建立糖尿病模型上百例，總結(jié)積累了很多的實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)與方法，本文就把糖尿病動(dòng)物造模的方法分享給大家~

之前的糖尿病模型的實(shí)驗(yàn)介紹中，我們講到了糖尿病動(dòng)物模型的構(gòu)造有手術(shù)切除胰腺誘導(dǎo)、化學(xué)藥物誘導(dǎo)、自發(fā)性糖尿病、飲食誘導(dǎo)、基因修飾等方法來誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型，本文給大家詳細(xì)講解比較常見的手術(shù)切除胰腺誘導(dǎo)和藥物誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型兩種方法。

一、手術(shù)切除胰腺誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型步驟

胰腺切除法是最早的糖尿病動(dòng)物模型復(fù)制方法(制成一型糖尿病模型)。一般選用較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如狗和家兔等，其次用大鼠(小鼠不適用)。

其步驟是，切除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全部或大部分胰腺，但保存胰十二指腸動(dòng)脈吻合弓。如果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)兩天血糖值超過11.1 mmol/L或者葡萄糖耐量試驗(yàn)120 min時(shí)的血糖值仍未恢復(fù)到注射前水平則認(rèn)為DM造模成功。

二、化學(xué)藥物誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型步驟

運(yùn)用化學(xué)藥物損傷胰島B細(xì)胞導(dǎo)致胰島素缺乏而引起糖尿病(一型糖尿病)，常用的藥物有四氧嘧啶(Alloxan)和鏈脲佐菌素。

1、STZ誘發(fā)的糖尿病動(dòng)物模型(目前使用最為廣泛)

造模方法：注射前用0.05mol/L檸檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液，新鮮使用。大鼠糖尿病STZ的劑量為40~75mg/kg(靜脈注射或腹腔注射，一定要注意回抽，嚴(yán)格禁止注入胃腸道)。小鼠對(duì)此藥敏感性較差，常用量為100~200mg/kg(靜脈注射或腹腔注射)。

評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：注射STZ溶液2天或者3天后，連續(xù)3天采用尿糖檢測(cè)試紙檢測(cè)尿糖水平，血糖水平采用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)即可，若尿糖≥3，血糖持續(xù)升高，說明注射是沒問題。一周后大鼠出現(xiàn)三多一少癥狀，再次檢測(cè)，若尿糖≥3，血糖≥16.67mmol/L，說明造模成功。

2、四氧嘧啶(Alloxan)誘發(fā)糖尿病動(dòng)物模型操作步驟

四氧嘧啶(Alloxan)是一種特異的胰島細(xì)胞毒劑，可以通過超氧自由基破壞胰島B細(xì)胞，使得胰島素分泌減少，它常用于制備一型糖尿病動(dòng)物模型。

造模方法：一般配成1%-3%濃度即可使用。給藥劑量依動(dòng)物及給藥途徑不同而異(均需臨用前配置)，大鼠150-200 mg/kg(ip)，40-60 mg/kg(iv);小鼠200 mg/kg(ip)，85-100 mg/kg (iv)。

評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：用藥后2~3小時(shí)后出現(xiàn)初期高血糖，持續(xù)6~12小時(shí)后進(jìn)入低血糖期，動(dòng)物出現(xiàn)痙攣。注射后18h，大鼠即可出現(xiàn)高血糖、多尿、多飲等典型癥狀，血糖會(huì)升高至16.67mmol/以上，隨著時(shí)間的推移，2周左右即可形成一型糖尿病模型。

三、食物+化學(xué)誘導(dǎo)模型步驟（高脂高糖加鏈脲佐菌素誘導(dǎo)川型糖尿病模型）

這種模型就是先給大鼠喂高脂高糖飼料，以誘發(fā)胰島素抵抗，隨后再腹腔注射少量的鏈脲佐床素(STZ)使得部分胰島細(xì)胞遭到破壞，從而引起血糖的升高。

8周齡的SD大鼠高熱量飼喂2個(gè)月后，一次性腹腔注射15-30ma/ka劑量2%STZ溶液，可建立外周胰島素抵抗和胰島功能輕度受損的糖尿病動(dòng)物模型，與人Ⅱ型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過程相似，且STZ用量小，減少了對(duì)其他組織的損害。

高糖高脂飼料配方：66.5%普通飼料，20%蔗糖，10%豬油，2.5%膽固醇，1%膽酸鹽。

評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：造模3天后測(cè)定大鼠尾靜脈血糖，隨機(jī)血糖>16.7mmol/L視為建模成功。

好啦，那糖尿病動(dòng)物模型的造模步驟就講完啦，雖然造模方法過程大同小異，但是操作人員的技術(shù)與經(jīng)驗(yàn)也起到了非常重要的作用，尤其是手術(shù)和化學(xué)藥物誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型的方法，是否能構(gòu)建合適的疾病模型和降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的死亡率與實(shí)驗(yàn)人員的手法和藥物濃度的劑量都息息相關(guān)。所以如果您有糖尿病動(dòng)物模型外包的需求的話，歡迎選擇普拉特澤生物，隨時(shí)給客服留言~

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