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    TTC染色步驟和數(shù)據(jù)分析由普拉特澤生物組織染色實(shí)驗(yàn)平臺(tái)為大家總結(jié)分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長(zhǎng)期穩(wěn)定的TTC染色外包實(shí)驗(yàn)服務(wù)，本文給大家分享咱們技術(shù)長(zhǎng)期總結(jié)下來(lái)的TTC染色步驟+數(shù)據(jù)分析：

1.大鼠麻醉后，快速取出腦組織(10min內(nèi));

2.置于0-4℃℃PBS溶液中轉(zhuǎn)移，將腦組織-20℃冷凍20min;

3.將冷凍后的腦組織切成厚度為2 mm的薄片;

4.將腦組織切片置于1%TTC溶液中，37℃℃避光孵育30min，每5min輕微晃動(dòng)容器，使充分染色。

5.取出染好的切片，觀察染色情況，白色即為梗死區(qū)域。

6.選擇每一切片的尾側(cè)面用病理圖文分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析,測(cè)量每片的梗死面積和總面積。(每層梗死體積為該層梗死面積和層厚的乘積,各層的梗死體積之和即為總的梗死體積。

二、TTC計(jì)算分析:

1.原始圖片數(shù)據(jù)(PS初步合圖處理)2.分析處理步驟:純黑或純白背景轉(zhuǎn)換

(1)process(2)segmentation

（3）color cube basedwhite or black(5)吸管工具(不停點(diǎn)擊切片位置，選取圖片)(6)create previewimage

三、TTC計(jì)算分析:

1.計(jì)算分析步驟:
(1)measure
(2)count/size

(3)Select colors
(4)調(diào)整顏色通道:HSI通道 H:0-255;S:0-255;1:14-255

四、TTC計(jì)算分析:

3.計(jì)算分析步驟:(5)Measure-Select Measure

(6)設(shè)置面積選擇大小(1)area(2)1000-1000000(可根據(jù)實(shí)際情況而定)

五、TTC計(jì)算分析:

3.計(jì)算分析步驟:

(7)Count:開(kāi)始計(jì)算

(9)查看計(jì)算結(jié)果和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):

(8)計(jì)算后界面顯示:

六、TTC計(jì)算分析:
4.數(shù)據(jù)查看與導(dǎo)出:

導(dǎo)出步驟一:data to file導(dǎo)出步驟二:選擇導(dǎo)出格式

5.梗死面積選定設(shè)置:

HIS模式H:0-255;S:0-45;1:150-255(可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整)

6.設(shè)置完成，開(kāi)始統(tǒng)計(jì)計(jì)算:count;后面步驟和前面總面積計(jì)算一樣進(jìn)行，查看數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與數(shù)據(jù)文件導(dǎo)出，最后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)

7.總結(jié)總體面積與梗死面積，統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論，

如果你總是在做實(shí)驗(yàn)時(shí)總會(huì)遇上這樣那樣的問(wèn)題需要幫助時(shí)，請(qǐng)記得在TTC染色實(shí)驗(yàn)中遇到技術(shù)問(wèn)題可添加技術(shù)微信：18570028002我司還提供組織染色外包服務(wù)或?qū)嶒?yàn)培訓(xùn)