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    Question：ELISA實驗的方法有哪些？（普拉特澤生物提供長期穩(wěn)定的ELISA實驗外包服務）

    答：

一、 實驗目的

通過Elisa實驗技術檢測各樣本中目的蛋白的表達。

二、 實驗樣本

三、 實驗結果

1.標準品檢測值

2.標準品標準曲線

圖1  cTn-1 標準曲線

   標準曲線結果顯示，本次 cTn-1 檢測結果可信。

3. 樣品檢測結果

圖2  Elisa檢測柱狀圖

四、 結果說明

    如圖所示，與Sham組相比，3個CVB3病毒處理組無顯著性差異。

五、 ELISA實驗原理

往預先包被的微孔中依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的cTn-1呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度 (OD 值)，計算樣品濃度。

六、 實驗通用儀器及試劑

1. 主要儀器

2.主要試劑

六、重溫一下ELISA實驗步驟

1.樣品處理

血清：3000xg離心10分鐘，取上清即可檢測。

2.ELISA檢測步驟（以試劑盒操作說明書為準）

(1)制備好所有試劑、工作標準品和樣品。

(2)從板架上移除多余的微孔板條，將它們放入裝有干燥劑包的鋁箔袋中，重新密封并4oC存儲。

(3)向適當?shù)目字屑尤?/span>50μL樣品和標準品。

(4)每孔加入50μL抗體混合物。

(4)蓋好孔，在室溫下溫育1小時，400rpm搖動。

(5)棄去溶液并用洗滌緩沖液洗滌3次。

(6)向每個孔中加入100μlTMB,400rpm避光室溫孵育100min。

(7)每孔中添加100μL終止液，混勻1min,在450 nm處讀取吸光值。

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