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細(xì)胞操作的無菌環(huán)境與操作要點(diǎn)【細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包】

今天普拉特澤生物來跟大家一起學(xué)習(xí)的是：細(xì)胞操作的無菌環(huán)境與操作要點(diǎn)。普拉特澤細(xì)胞平臺(tái)為廣大科研工作者提供各類細(xì)胞實(shí)驗(yàn)代做與細(xì)胞購買服務(wù)，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)嚴(yán)格在無菌的環(huán)境下進(jìn)行同時(shí)遵守各項(xiàng)無菌操作要領(lǐng)，保證樣本不受污染與結(jié)果的正確性。細(xì)胞在脫離體內(nèi)的環(huán)境后，沒有了保護(hù)防線，極其容易被支原體、細(xì)菌真菌等感染，造成樣本的破壞損失影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此無菌操作在所有的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中都是非常重要但又常犯的錯(cuò)誤，今天我們就來看看細(xì)胞操作的無菌環(huán)境到底是怎樣的，無菌操作要點(diǎn)有哪些。

一、細(xì)胞的無菌操作環(huán)境
在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。無菌技術(shù)就像是一道屏障很大程度上保護(hù)細(xì)胞不受環(huán)境微生物的污染。無菌環(huán)境的基本要素包括：

1、實(shí)驗(yàn)員穿戴好一次性帽子、口罩、手套以及實(shí)驗(yàn)服才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室；

2、實(shí)驗(yàn)操作前，打開超凈工作臺(tái)紫外燈照射30-60min滅菌，后用75%酒精擦拭操作臺(tái)面并打開超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)通風(fēng)；

3、槍頭、培養(yǎng)皿、離心管等常用耗材需要通過傳遞倉紫外消毒后進(jìn)入細(xì)胞間，再拿到超凈臺(tái)內(nèi)再行拆封使用；

4、冰箱中取出培養(yǎng)基復(fù)溫，將培養(yǎng)基以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配置的溶液試劑噴涂75%的酒精后放入超凈工作臺(tái)中；

5、在打開培養(yǎng)箱之前，實(shí)驗(yàn)員的手和培養(yǎng)箱需要先噴涂酒精擦拭，消毒后再將細(xì)胞從培養(yǎng)箱中取出放置于超凈工作臺(tái)中。

二、細(xì)胞無菌操作的要點(diǎn)

根據(jù)操作的需求，我們將工作臺(tái)劃分為三個(gè)區(qū)域：分別是潔凈區(qū)、操作區(qū)和污染區(qū)。

培養(yǎng)基槍頭、培養(yǎng)皿等細(xì)胞培養(yǎng)常用的試劑耗材放置在潔凈區(qū)，酒精燈、移液槍、待處理的細(xì)胞等操作中需要用到的物品放置在操作區(qū)，打火機(jī)、記號(hào)筆、廢液缸等放置在污染區(qū)。

進(jìn)行操作前，需要要點(diǎn)燃酒精燈。我們將酒精燈火焰附近10cm范圍內(nèi)視為無菌區(qū)，為了保證實(shí)驗(yàn)過程中的無菌環(huán)境，所有的操作盡量在無菌區(qū)進(jìn)行。操作時(shí)我們要注意：

1、打開瓶蓋前，需要對瓶頸、螺旋蓋進(jìn)行灼燒，瓶蓋打開后將敞開一側(cè)朝下放在無菌區(qū)內(nèi)。瓶口敞開期間，手和其他物品不可從上方經(jīng)過。移液操作盡可能迅速，操作完后立即灼燒螺旋蓋消毒后蓋上。

2、移液操作時(shí)用到的槍頭必須保證無菌，移液槍在使用時(shí)槍身不能碰到容器內(nèi)側(cè)，如果移液槍在使用過程中被液體污染需更換新的移液槍。

3、無菌槍頭均為一次性使用，如果在使用過程中不小心脫落，需更換新槍頭。移液過程中如果有試劑不小心滴落在超凈臺(tái)面上，需用75%的酒精擦拭干凈。

4、廢液在棄去時(shí)，需使用移液槍操作，不可直接倒入廢液缸中，以防液體飛濺污染瓶口。全部操作結(jié)束后，方可蓋上酒精燈蓋熄滅火焰。

5、用完的試劑用封口膜封住后，移出操作臺(tái)，放回4℃儲(chǔ)存。潔凈的槍頭、培養(yǎng)皿、移液槍等可繼續(xù)放置在超凈臺(tái)內(nèi)，廢液缸需清理洗凈，用酒精消毒后再放回超凈臺(tái)。

6、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面用75%酒精噴灑后再用無菌布擦拭干凈，最后關(guān)閉玻璃門，打開紫外燈消毒30-60 min，為下一次的實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

在細(xì)胞培養(yǎng)操作中為了保證細(xì)胞能健康成長，我們需要杜絕因?yàn)椴僮鞫鴮?dǎo)致的污染，努力地為細(xì)胞提供無菌的培養(yǎng)環(huán)境。所以如果您也有過因?yàn)椴灰?guī)范的培養(yǎng)或不知道怎樣無菌操作而污染過細(xì)胞，那普拉特澤生物一定要跟您一起學(xué)習(xí)共勉啦。

記得，做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、買細(xì)胞，找普拉特澤！

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