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細(xì)胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分【細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包】

大家好，今天普拉特澤生物給為大家介紹的是細(xì)胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分。普拉特澤生物——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)不僅可以承接代做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包更有自己的細(xì)胞庫(kù)可以購(gòu)買細(xì)胞，而培養(yǎng)基不管是在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中還是在細(xì)胞的培養(yǎng)傳代中最重要的外在因素，因此技術(shù)專門為大家出一期關(guān)于培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分來(lái)幫助大家了解和挑選培養(yǎng)基。

細(xì)胞在培養(yǎng)基中，不僅要能夠存活，還要分裂增殖，因此合適的滲透壓，PH值、溫度等理化性質(zhì)是細(xì)胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件，咱們一個(gè)一個(gè)看：

1、PH值
大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞的適宜PH在7.2~7.4之間；一些正常的成纖維細(xì)胞系卻在PH7.4~7.7之間生長(zhǎng)較好，而一些轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能在PH7.0~7.4之間生長(zhǎng)較好。細(xì)胞培養(yǎng)基的PH值通常依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅指示劑來(lái)判斷，不同的PH，培養(yǎng)基會(huì)呈現(xiàn)不同的顏色變化，PH7.8時(shí)，呈現(xiàn)紫色，PH7.6呈現(xiàn)桃紅色，PH7.4呈現(xiàn)紅色，PH7.0呈現(xiàn)橘紅色，PH6.5時(shí)呈現(xiàn)檸檬黃色。

2、緩沖能力

細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力。細(xì)胞代謝過(guò)程中產(chǎn)生的CO2是造成細(xì)胞培養(yǎng)基PH值波動(dòng)的主要原因，在封閉式培養(yǎng)過(guò)程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生酸，細(xì)胞培養(yǎng)基PH值很快下降；打開培養(yǎng)器皿時(shí)CO2逸出則會(huì)引起PH值升高。NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)是細(xì)胞培養(yǎng)基中最常用的緩沖系統(tǒng)，此外磷酸鹽緩沖系統(tǒng)也可以獲得緩沖能力，相比碳酸鹽緩沖系統(tǒng)其能力較低，但因其對(duì)細(xì)胞毒性小，成本低，在細(xì)胞培養(yǎng)中也得到廣泛應(yīng)用。還有一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液，在PH7.0~7.2范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加合適濃度的HEPES，可以較好地控制PH值在適宜的范圍內(nèi)，然而高濃度的HEPES可能對(duì)細(xì)胞有毒性作用，所以在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)添加的濃度一般為10-25mmol/L.

3、滲透壓

細(xì)胞必須生活在等滲的環(huán)境中，大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定的耐受性。人血漿滲透壓約為290 mOsm/kg,可視為培養(yǎng)人體細(xì)胞的理想滲透壓。鼠細(xì)胞的滲透壓在320 mOsm/kg左右。研究顯示，對(duì)于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，滲透壓在290-320 mOsm/kg的范圍內(nèi)都適宜。在生產(chǎn)、配制細(xì)胞培養(yǎng)基的過(guò)程中，滲透壓的測(cè)定可以防止在生產(chǎn)中出現(xiàn)稱量錯(cuò)誤。

4、溫度

溫度對(duì)培養(yǎng)基有較大的影響。較高的溫度可引起營(yíng)養(yǎng)成分的降解或破壞，細(xì)胞培養(yǎng)基的PH值，離子強(qiáng)度和電解常數(shù)等都可能會(huì)受到影響。

血細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)基必須含有充分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，滿足完成新細(xì)胞合成、細(xì)胞代謝等生物反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成分有水，氨基酸，維生素、碳水化合物、無(wú)機(jī)鹽和其它一些輔助營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。傳統(tǒng)的合成細(xì)胞培養(yǎng)基在使用時(shí)還需要添加一定量的血清才能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。低血清細(xì)胞培養(yǎng)基或無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基則是在合成細(xì)胞培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，通過(guò)調(diào)整營(yíng)養(yǎng)成分配比和含量，或添加一些血清代替因子，來(lái)滿足細(xì)胞在低血清或無(wú)血清狀態(tài)下的生長(zhǎng)需求。

1、水

水不僅是細(xì)胞的主要成分，也是細(xì)胞賴以生存的主要環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中，才能被細(xì)胞吸收和排泄。細(xì)胞培養(yǎng)基中90%以上的成分是水。在配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，需要用到新鮮制備的超純水，不同地區(qū)水質(zhì)可能偏酸或偏堿，在配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，pH需要調(diào)節(jié)到適宜的范圍。

2、能源和碳源

能源和碳源主要用于維持細(xì)胞生命和支持細(xì)胞生長(zhǎng)，主要包括糖，糖酵解的產(chǎn)物和谷氨酰胺，其他氨基酸是次要的能源和碳源物質(zhì)。目前大多數(shù)細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)都會(huì)選擇葡萄糖作為主要碳源和能源。

3、氮源

不同細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異，一些必須氨基酸在細(xì)胞中不能合成，比如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、精氨酸及谷氨酰胺等，在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加的濃度較高，尤其是谷氨酰胺對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響非常大，許多對(duì)谷氨酰胺依賴性較強(qiáng)的細(xì)胞甚至需要在培養(yǎng)基的基礎(chǔ)濃度上額外添加。而非必須氨基酸，細(xì)胞可以自己合成或通過(guò)其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化得到，也需要在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度來(lái)減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān)。

4、維生素

維生素是維持細(xì)胞正常生理狀態(tài)的一種重要的活性物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞代謝有重要作用，但是在不同配方的培養(yǎng)基中濃度差異較大。

5、無(wú)機(jī)離子

無(wú)機(jī)鹽是細(xì)胞維持生命活動(dòng)所不可缺少的營(yíng)養(yǎng)成分。無(wú)機(jī)離子主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、CI-、PO43-、SO42-、HCO3-等，維持細(xì)胞培養(yǎng)基滲透壓平衡，參加細(xì)胞的活動(dòng)代謝。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，各種離子會(huì)起到不同的作用，不同細(xì)胞對(duì)離子濃度的需求也會(huì)有差異。保持培養(yǎng)基中離子濃度的穩(wěn)定以及各種離子間的平衡具有重要意義。
好啦，那關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)基的介紹我們就講完啦，如果您也想要培養(yǎng)細(xì)胞或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)需要外包、買細(xì)胞的話都可以直接留言哦，普拉特澤生物細(xì)胞平臺(tái)的技術(shù)門斗歡迎跟大家進(jìn)行技術(shù)上的交流~

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