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        細胞劃痕實驗操作步驟由普拉特澤生物實驗技術為大家總結分享。細胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移的方法。普拉特澤生物——細胞實驗平臺專業(yè)承接細胞劃痕等細胞實驗代做服務，積累了大量的實操經(jīng)驗。今天小編就跟大家分享，在實操錘煉打磨中出來的細胞劃痕實驗Culture Insert方法和普通細胞劃痕的操作步驟，一起來看看吧~

        一、細胞劃痕實驗Culture Insert方法操作步驟

        1、準備細胞，培養(yǎng)液，culture lnsert。

        2、如圖，將細胞接種于Dish中間的Insert，細胞長滿Insert 區(qū)域后用鑷子移除Insert即可產(chǎn)生500μm寬度的劃痕。

        3、每隔4-6小時拍照記錄。

        4、根據(jù)收集圖片數(shù)據(jù)分析實驗結果。

        二、常規(guī)細胞劃痕法操作步驟

        實驗器材：細胞培養(yǎng)板、marker筆、直尺、微升槍頭、培養(yǎng)基、PBS

        1、培養(yǎng)板劃線

        首先使用 marker 筆在 6 孔板背后，用直尺比著，均勻的劃橫線，大約每隔 0.5~1cm 一道，橫穿過孔。每孔至少穿過 5 條線。劃線時注意線不要太粗 。

        2、鋪細胞

        在孔中加入約 5×105 個細胞（不同的細胞數(shù)量有所不同，根據(jù)細胞的生長快慢調(diào)整），接種原則為過夜后融合率達到 100%。

        3、細胞劃線

        第二天用槍頭或者無菌牙簽，垂直與細胞平面，沿著頭一天劃在平板背面的線在細胞層上進行劃痕(不同孔之間最好使用同一只槍頭或牙簽)。

        4、洗細胞

        劃痕完成后，使用無菌 PBS 洗細胞 3 次，洗去不貼壁的細胞，即劃線時劃線的細胞，是劃線后留下的間隙清晰可見，然后更換新鮮無血清培養(yǎng)基。

        5、細胞培養(yǎng)、觀察

        將細胞放入 37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。然后在適當?shù)臅r間點，如 0，6，12，24h 取出細胞，顯微鏡線觀察并測量劃痕的寬度，并拍照(具體時間依實驗需要而定)。

        6、結果分析

        使用 Image J 軟件打開圖片后，隨機劃取 6 至8 條水平線，計算細胞間距離的均值。

        注意：保持實驗環(huán)境的無菌性；選擇適當?shù)募毎N壁；采用無血清培養(yǎng)液

        好啦，那實驗結果我們就分享到這里啦！如果您還有關于細胞劃痕實驗的操作問題需要咨詢或有細胞劃痕實驗代做的需求，可以直接留言給客服，技術會第一時間回復到您的哦！