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植物組織的培養(yǎng)方法【細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包】

2022-08-17 15:47:45

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

        植物組織培養(yǎng)方法由普拉特澤生物——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺總結(jié)分享。細(xì)胞的培養(yǎng)是所有細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作的基礎(chǔ),分化、培養(yǎng)出健康的細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)三個研究領(lǐng)域都舉足輕重的重要,普拉特澤生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺專業(yè)承接幾十種細(xì)胞實(shí)驗(yàn),技術(shù)們在各種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的操作中身經(jīng)百戰(zhàn),細(xì)胞培養(yǎng)方面技能點(diǎn)早已點(diǎn)滿,今天咱們就來分析分析——植物組織培養(yǎng)的介紹與詳細(xì)步驟!

        上期我們講完了動物細(xì)胞原代與傳代培養(yǎng)的詳細(xì)步驟,可以跟植物細(xì)胞的培養(yǎng)步驟對比記憶,記得更深哦,鏈接奉上,溫故而知新哦:

       動物細(xì)胞原代培養(yǎng)……………………………………實(shí)操步驟》

        動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)……………………………………實(shí)操步驟》

          老生常談了,要學(xué)習(xí)一個東西我們要從是什么、為什么、怎么做、三個方面來了解。
   一、什么是植物組織培養(yǎng)呢?

          植物組織培養(yǎng)是在離體條件下,將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行震蕩培養(yǎng),得到分散成游離的懸浮細(xì)胞,通過繼代培養(yǎng)使細(xì)胞增殖,從而獲得大量細(xì)胞群體的一種技術(shù)。

           一、為什么要分離培養(yǎng)植物組織或細(xì)胞?

            1、植物細(xì)胞的培養(yǎng)在研究細(xì)胞的增殖、分化、代謝、運(yùn)動、衰老、死亡等方面都是重要的研究手段,且是細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、起源、基因表達(dá)與調(diào)控方面的基礎(chǔ)研究條件。

            2、可以從植物細(xì)胞培養(yǎng)中獲得香料、藥品、食品添加劑。

            3、擴(kuò)大了植物繁殖途徑,便于無性微繁體系的保存,對珍惜瀕危物種保護(hù)有重大意義,有利于種子繁殖率低的植物的保護(hù),便于工廠化生產(chǎn)等

           三、植物組織培養(yǎng)應(yīng)該怎么做?

           1、外植體的選擇和預(yù)處理

         1外植體外植體是指從植物體上取出的用于無菌培養(yǎng)或直接分離細(xì)胞的部分植物組織或器官,我們可以從植物體的各個部位都可以成功地獲得植物細(xì)胞,但是不同植物、不同器官的脫分化和再分化能力不同,分離細(xì)胞和原生質(zhì)體的難易和效果也有很大差異。

         2無菌和消毒:通常應(yīng)當(dāng)選擇生長正常、無病蟲害的植株,并從中選擇適宜的組織器官作為外植體,主要包括:

        莖尖、莖段及葉片的消毒處理

        果實(shí)及種子的消毒處理

        根及地下貯藏器官等的消毒處理

        花藥的消毒處理

        外植體的其他處理

            2、愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生

            植物細(xì)胞的全能性在發(fā)育和分化的過程中并不會喪失,但在完整的植株中每個細(xì)胞都是組織的一員。幾乎所有高等植物細(xì)胞,一旦脫離了母體植株,擺脫了原來所受到的遺傳上的控制和生理上的制約,在不定期下的培養(yǎng)條件下,就會發(fā)生一種回復(fù)變化,從而失去分化狀態(tài),變?yōu)榉稚?xì)胞,實(shí)現(xiàn)脫分化過程。

            然后,這些脫分化細(xì)胞經(jīng)過連續(xù)的有絲分裂,形成愈傷組織,愈傷組織的形成主要分為誘導(dǎo)期、分裂期、形成期三個時期。

             3、愈傷組織的繼代培養(yǎng)

            脫分化細(xì)胞不斷進(jìn)行分裂,從而形成了愈傷組織,愈傷組織在培養(yǎng)基上生長一段時間以后,由于營養(yǎng)物質(zhì)枯竭,水分散失,以及代謝產(chǎn)物的積累,必須轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上培養(yǎng)。這個過程叫做繼代。

            通過繼代培養(yǎng),可使愈傷組織無限期地保持在不分的增殖狀態(tài)。然而,如果讓愈傷組織留原培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)而不繼代,它們則不可避免地發(fā)生分化,產(chǎn)生新的結(jié)構(gòu)。

             4、愈傷組織的生長

             脆的愈傷組織是進(jìn)行懸浮培養(yǎng)最適合的材料,稍經(jīng)機(jī)械振蕩即可使組織分散成單細(xì)胞或少數(shù)幾個細(xì)胞組成的小細(xì)胞團(tuán)。在培養(yǎng)中細(xì)胞產(chǎn)生迅速增殖,而堅(jiān)實(shí)的愈傷組織中的細(xì)胞間被果膠質(zhì)緊緊地粘著,因而往往不能形成良好的懸浮系統(tǒng)。

             一般愈傷組織的增殖生長只發(fā)生在不與瓊脂接觸的表面,而與瓊脂接觸的一面極少細(xì)胞增殖,只是細(xì)胞分化形成緊密的組織塊。它是愈傷組織表面或近表面瘤狀物生長的結(jié)果。

             愈傷組織之間的質(zhì)地有顯著不同,有的很松脆,有的很堅(jiān)實(shí),且這兩類愈傷組織可互相轉(zhuǎn)變。其方法是:加入高濃度的生長物質(zhì),可使堅(jiān)實(shí)的愈傷組織變?yōu)樗纱?。反之,減低或除去生長物質(zhì),則松脆的愈傷組織可以轉(zhuǎn)變?yōu)閳?jiān)實(shí)。

              5、愈傷組織形態(tài)的調(diào)控

             來源于不同植物或同一種植物不同部們的愈傷組織,在顏色、結(jié)構(gòu)和生長習(xí)性上都可能存在差異,其遺傳生理功能也可能或是具有胚性,或是不具胚性,在不同的實(shí)驗(yàn)中由于目的的不同,對愈傷組織狀態(tài)的要求也不完全相同,但優(yōu)良的愈傷組織通常必須具備以下4個特性中的2-3

            1高度的胚性或再分化能力,以便從這些愈傷組織得到再生植物。

            2容易散碎,以便用這些愈傷組織建立優(yōu)良的懸浮系,并且在需要時能從中分離出全能性的原生質(zhì)體。

             3旺盛的自我增殖能力,以便用這些愈傷組織建立大規(guī)模的愈傷組織無性系。

             4經(jīng)過長期繼代保存而不喪失胚性,有便有可能對它們進(jìn)行各種遺傳操作。細(xì)胞和愈傷組織的形態(tài)發(fā)生,主要受外植體本身、培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境等三大類因素的調(diào)控。

              好啦,那關(guān)于植物組織培養(yǎng)的詳細(xì)方法就介紹到這里啦,共細(xì)胞培養(yǎng)的小白們簡單參考,如果您有細(xì)胞培養(yǎng)或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)代做的需求與技術(shù)需要咨詢,歡迎留言和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺的技術(shù)溝通哦!


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