GUS染色
GUS染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菍?duì)植物樣本進(jìn)行染色，因?yàn)榻^大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在內(nèi)源GUS活性，因此GUS基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報(bào)告基因。
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【實(shí)驗(yàn)原理】
GUS（β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶）基因是目前常用的一種報(bào)告基因，其表達(dá)產(chǎn)物β-葡萄糖苷酸酶是一種水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類(lèi)物質(zhì)的水解，它可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，縮寫(xiě)為X-Gluc）分解為藍(lán)色物質(zhì)。
（1）組織化學(xué)染色定位方法
（2）熒光法測(cè)定GUS活性
（3）分光光度法測(cè)定GUS活性
【實(shí)驗(yàn)方法
以某植物樣本為例：
step1: 90%丙酮固定20min;
(丙酮(acetoue)涉透力很強(qiáng)，能使蛋白質(zhì)沉流凝固，但不影響蛋白質(zhì)的功能基團(tuán)而保存鼻的活性，用于固定磷酸酶和氧化酶效果較好，因此可用于GUS染色前的固定，可防止GuS信號(hào)的擴(kuò)散。鐵點(diǎn)是固定快。滲透力強(qiáng)，易使組織細(xì)胞收縮。保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠佳。一般4C下20分鐘為直)
Step2 : 加1 mL GUS洗液洗去丙酮，洗2遍:
Step3 : 加GUS染色液，冰上抽真空15-20 min;
Step4 : 37C放置，隔一陣觀察- -下，染上色了就進(jìn)行下面步驟:
Step5 : 吸出染色液，加入1mL 70%乙醇，停止染色反應(yīng)及脫色:
Step6 : 更換幾次乙醇直到脫色完全;
Step7 : 解剖鏡及顯微鏡拍照觀察
載玻片上加適量HCG透明液，用鑷子取出幼苗在透明液中鋪平，蓋上蓋玻片，解剖鏡觀察整株，顯微鏡觀察細(xì)節(jié)并拍照。
【交付標(biāo)準(zhǔn)】
1. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
2. 真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3. 原始圖片
4. 實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)
5. 剩余物料在周期內(nèi)可返還（超過(guò)周期，不予返還）
【送檢流程】
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