相關實驗
實驗承諾函
咨詢記錄
技術文章
城市
時間
廣東省東莞市
2026-01-10 07:40:06
浙江省麗水市
2026-01-10 04:31:07
浙江省麗水市
2026-01-10 04:31:06
福建省福州市
2026-01-10 01:39:36
江蘇省南通市
2026-01-10 01:29:57
江蘇省無錫市
2026-01-10 01:17:03
湖北省武漢市
2026-01-09 19:37:27
國外
2026-01-09 16:53:31
福建省福州市
2026-01-09 16:52:34
江蘇省蘇州市
2026-01-09 11:55:59
基因表達調(diào)控基本特點
2024-07-19 14:50:50
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗實驗標準曲線
2024-03-28 16:06:29
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗結果分析
2024-03-28 13:44:05
ELISA原理、操作以及注意事項
2024-03-26 17:21:23
QPCR目的和意義
2024-01-15 17:36:24
核質(zhì)分離實驗QPCR數(shù)據(jù)處理
2024-01-15 15:05:16
QPCR數(shù)據(jù)分析以及作圖方法
2024-01-11 14:23:33
QPCR實驗設計【QPCR實驗外包】
2024-01-10 17:03:29
QPCR原理和主要的三個步驟
2024-01-09 17:37:18
QPCR原理以及數(shù)據(jù)處理
2024-01-05 14:09:57
QPCR檢測實驗詳細的步驟與報告（三）
2024-01-05 13:07:01
QPCR檢測實驗詳細的步驟與報告（二）
2024-01-04 17:05:09
QPCR檢測實驗詳細的步驟與報告(一）
2024-01-04 13:48:46
QPCR檢測的是什么？
2024-01-03 17:34:53
WB檢測實驗報告和詳細的操作步驟（下）
2023-12-21 14:42:54
WB檢測實驗報告和詳細的操作步驟（中）
2023-12-21 13:36:16
WB檢測實驗報告和詳細的操作步驟(上)
2023-12-20 16:36:30
什么是western blot？
2023-12-20 14:22:03
PCR設計引物的具體步驟【科研干貨】
2023-11-17 13:59:50
引物設計的依據(jù)【小白適用】
2023-11-16 14:40:06
qPCR引物設計流程【一文搞懂】
2023-11-16 13:11:45
如何巧妙設計引物？
2023-11-14 17:29:47
關于SNP檢測流程和應用
2023-03-29 11:24:18
做酶聯(lián)免疫吸附劑測定實驗需要注意什么？
2023-03-27 16:28:08
實時熒光定量 PCR（qPCR）的介紹
2023-03-20 13:08:33
WB實驗檢測介紹——檢測小鼠組織中GSTM2的表達
2023-03-17 14:12:46
WB實驗原理及流程圖
2023-03-16 16:25:48
亞硫酸氫鈉測序（BSP）實驗步驟【BSP外包】
2022-11-22 15:00:00
什么是亞硫酸氫鈉測序？【甲基化檢測外包】
2022-11-18 15:47:24
DNA染色法檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-04 10:39:27
培養(yǎng)法檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-04 10:22:06
PCR檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-03 17:25:02
支原體檢測方法大全【支原體檢測外包】
2022-11-02 17:03:33
什么是支原體檢測？【支原體檢測外包】
2022-10-27 17:48:46
SNP檢測常見問題答疑下篇
2022-08-09 19:14:35
SNP檢測常見問題答疑上篇
2022-08-09 11:24:24
直接測序法檢測SNP詳解——最常用的方法
2022-08-05 08:58:37
Taqman探針法檢測SNP分型詳解
2022-08-04 15:12:43
SNP檢測方法總結，有你用過的嗎？
2022-08-02 17:56:41
SNP/單核苷酸多態(tài)性檢測最常用的三種方法
2022-08-02 15:23:47
什么是SNP/單核苷酸多態(tài)性？
2022-08-02 14:16:49
?實時熒光定量PCR實驗技術答疑
2022-07-28 13:55:45
實時熒光定量PCR常見問題及解決方法
2022-07-27 17:12:19
熒光定量PCR實操注意事項，注意避雷！
2022-07-27 11:49:18
熒光定量PCR結果分析解讀—熒光定量PCR外包
2022-07-26 11:17:27
熒光定量PCR實驗操作步驟，你做對了嗎？
2022-07-25 17:11:08
什么是實時熒光定量PCR？
2022-07-22 10:18:49
六種甲基化檢測方法【附視頻教程】
2022-05-16 17:09:40
DNA甲基化實驗操作步驟
2022-05-13 11:52:54
?DNA甲基化實驗介紹【科研小白】
2022-05-13 10:27:04
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實操作常見問題處理方法【干貨滿滿】
2022-04-08 16:34:54
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實驗操作常見問題答疑【附視頻教程】
2022-04-07 17:30:33
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實驗操作注意事項【附視頻教程】
2022-04-07 16:07:13
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實驗詳細操作步驟【附視頻教程】
2022-04-07 13:27:43
科研小白看的ELISA酶聯(lián)免疫吸附實驗簡介與原理【附視頻教程】
2022-04-06 16:01:15
高分文章都怎么研究m6A甲基化
2022-01-10 14:50:24
DNA甲基化提高癌細胞對EGFR抑制劑敏感性的原因
2021-10-27 00:29:41
高分文章研究RNA甲基化詳細步驟
2021-10-26 17:19:51
m6A甲基化研究思路設計方法
2021-10-26 15:44:54
Nature子刊 | DNA甲基化 甲基轉移酶異位靶向擬南芥中CG
2021-05-27 17:59:59
實時熒光定量PCR檢測步驟和注意事項【附視頻教程】
2021-04-26 21:06:57
甲基化檢測的幾種方法和實驗流程【附視頻教程】
2021-04-23 11:19:00
細胞因子檢測方法怎么選？常用檢測方法優(yōu)缺點整理
2021-04-12 15:25:26
這是我見過的WB結果圖最多的文章！【文獻解讀】
2020-12-17 15:53:24
如何搞定Western Blot中的“奇葩”條帶【干貨文章】
2020-12-11 15:32:22
免疫沉淀及Pulldown這些方法原理你了解多少【新手入門】
2020-12-11 15:01:28
WB實驗技術介紹【新手入門】
2020-12-11 14:59:38
實驗介紹
【實驗原理】
蛋白免疫印跡（Western Blot）是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術，現(xiàn)已廣泛應用于基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。
【實驗方法】
Step1: 蛋白樣品裂解，細胞需提前裂解
Step2: SDS-PAGE凝膠電泳
Step3: 轉膜
Step4: 免疫反應
Step5: 化學發(fā)光
Step6: 結果分析
案例展示
WB灰度分析柱狀圖 WB凋亡相關蛋白表達
技術總結
1、 當進行接觸濾紙、凝膠和膜的操作時，應戴手套。手上的油脂會阻斷轉移
2、濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡，氣泡會造成短路
3、因為PVDF膜的疏水性，膜必須首先在甲醇中完全浸濕。而且在以后的操作中，膜也必須隨時保持濕潤（干膜法除外）。
4、濾紙可以重復利用，上層濾紙（靠膜）內(nèi)吸附有很多轉移透過的蛋白質(zhì)，所以上下濾紙一定不能弄混，在不能分辨的情況下，可以將靠膠濾紙換新的。
5、轉移時間一般為1.5 小時，( 1mA-2mA/cm2，10% gel)，可根據(jù)分子量大小調(diào)整轉移時間和電流大小。
送檢流程與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 動物組織 | 單個樣品>0.1g，2mlEP管或凍存管裝，不要過量；樣本應盡量新鮮，如不能立即提取蛋白或核酸，應液氮速凍后凍存于-80℃或更低，凍存樣本避免反復凍融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記，且標記清晰可識 |
| 種子樣本 | 去殼新鮮或保存于液氮中的的種子樣本，單個樣品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
| 貼壁/懸浮細胞 | 1. 總RNA或蛋白：106cell/指標、漿/核RNA或蛋白：107cell/指標、線粒體RNA或蛋白：2*107 cell/指標，樣本盡量新鮮，細胞收取后直接加Trizol（QPCR檢測）或直接凍存于-80℃ 2. 若細胞處理（加藥、轉染、感染）后狀態(tài)差應酌情加大收樣量 | -80℃ | 干冰 | |
| 全血/血清樣品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml； -80℃保存不超半周的白細胞勻漿>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
| 石蠟包埋樣品 | 由標準的石蠟包埋盒包埋的石蠟塊，有效厚度大于 0.1cm； 新鮮的 FFPE 組織切片，每片厚度不超過 10μm，2~8 張，表面積不超過 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 抗體 | 1. 按樣本種屬提供滿足相應實驗要求的抗體； 2. 按抗體說明書要求寄送，盡量避免分裝；如分裝，確保量足夠進行實驗，并提供抗體說明書。 3.保存抗體的抗體管上應有能夠識別此抗體的標記，抗體的量應大于實驗所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 引物 | 干粉，≥1OD，如進行預實驗，每個基因至少提供兩對引物， 附帶公司引物合成單。 | -20℃ | 冰袋或常溫 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關注公眾號
湘公網(wǎng)安備