支原體檢測
支原體是細(xì)胞外生存的最小微生物，是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。通過對支原體特定的序列設(shè)計(jì)引物，當(dāng)存在支原體污染時(shí)通過PCR特異性擴(kuò)增，會(huì)將目標(biāo)DNA特異性地復(fù)制，然后通過瓊脂糖電泳檢測，會(huì)跑出條帶出現(xiàn)陽性結(jié)果。反之當(dāng)沒有支原體污染時(shí)，由于沒有模板，PCR無法擴(kuò)增，則瓊脂糖電泳跑不出條帶，出現(xiàn)陰性結(jié)果。
相關(guān)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)承諾函
咨詢記錄
技術(shù)文章
城市
時(shí)間
江蘇省南通市
2026-01-10 10:40:07
江蘇省鎮(zhèn)江市
2026-01-09 20:37:00
國外
2026-01-09 16:53:23
浙江省寧波市余姚市
2026-01-09 15:38:34
浙江省麗水市
2026-01-09 04:48:18
浙江省湖州市
2026-01-08 21:07:46
江蘇省鎮(zhèn)江市
2026-01-08 09:19:23
江蘇省蘇州市
2026-01-08 01:14:35
江蘇省南通市
2026-01-07 11:50:48
浙江省麗水市
2026-01-07 02:04:47
基因表達(dá)調(diào)控基本特點(diǎn)
2024-07-19 14:50:50
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2024-03-28 16:06:29
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果分析
2024-03-28 13:44:05
ELISA原理、操作以及注意事項(xiàng)
2024-03-26 17:21:23
QPCR目的和意義
2024-01-15 17:36:24
核質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)QPCR數(shù)據(jù)處理
2024-01-15 15:05:16
QPCR數(shù)據(jù)分析以及作圖方法
2024-01-11 14:23:33
QPCR實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)【QPCR實(shí)驗(yàn)外包】
2024-01-10 17:03:29
QPCR原理和主要的三個(gè)步驟
2024-01-09 17:37:18
QPCR原理以及數(shù)據(jù)處理
2024-01-05 14:09:57
QPCR檢測實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的步驟與報(bào)告（三）
2024-01-05 13:07:01
QPCR檢測實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的步驟與報(bào)告（二）
2024-01-04 17:05:09
QPCR檢測實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的步驟與報(bào)告(一）
2024-01-04 13:48:46
QPCR檢測的是什么？
2024-01-03 17:34:53
WB檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告和詳細(xì)的操作步驟（下）
2023-12-21 14:42:54
WB檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告和詳細(xì)的操作步驟（中）
2023-12-21 13:36:16
WB檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告和詳細(xì)的操作步驟(上)
2023-12-20 16:36:30
什么是western blot？
2023-12-20 14:22:03
PCR設(shè)計(jì)引物的具體步驟【科研干貨】
2023-11-17 13:59:50
引物設(shè)計(jì)的依據(jù)【小白適用】
2023-11-16 14:40:06
qPCR引物設(shè)計(jì)流程【一文搞懂】
2023-11-16 13:11:45
如何巧妙設(shè)計(jì)引物？
2023-11-14 17:29:47
關(guān)于SNP檢測流程和應(yīng)用
2023-03-29 11:24:18
做酶聯(lián)免疫吸附劑測定實(shí)驗(yàn)需要注意什么？
2023-03-27 16:28:08
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）的介紹
2023-03-20 13:08:33
WB實(shí)驗(yàn)檢測介紹——檢測小鼠組織中GSTM2的表達(dá)
2023-03-17 14:12:46
WB實(shí)驗(yàn)原理及流程圖
2023-03-16 16:25:48
亞硫酸氫鈉測序（BSP）實(shí)驗(yàn)步驟【BSP外包】
2022-11-22 15:00:00
什么是亞硫酸氫鈉測序？【甲基化檢測外包】
2022-11-18 15:47:24
DNA染色法檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-04 10:39:27
培養(yǎng)法檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-04 10:22:06
PCR檢測支原體操作步驟【支原體檢測外包】
2022-11-03 17:25:02
支原體檢測方法大全【支原體檢測外包】
2022-11-02 17:03:33
什么是支原體檢測？【支原體檢測外包】
2022-10-27 17:48:46
SNP檢測常見問題答疑下篇
2022-08-09 19:14:35
SNP檢測常見問題答疑上篇
2022-08-09 11:24:24
直接測序法檢測SNP詳解——最常用的方法
2022-08-05 08:58:37
Taqman探針法檢測SNP分型詳解
2022-08-04 15:12:43
SNP檢測方法總結(jié)，有你用過的嗎？
2022-08-02 17:56:41
SNP/單核苷酸多態(tài)性檢測最常用的三種方法
2022-08-02 15:23:47
什么是SNP/單核苷酸多態(tài)性？
2022-08-02 14:16:49
?實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)答疑
2022-07-28 13:55:45
實(shí)時(shí)熒光定量PCR常見問題及解決方法
2022-07-27 17:12:19
熒光定量PCR實(shí)操注意事項(xiàng)，注意避雷！
2022-07-27 11:49:18
熒光定量PCR結(jié)果分析解讀—熒光定量PCR外包
2022-07-26 11:17:27
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)操作步驟，你做對了嗎？
2022-07-25 17:11:08
什么是實(shí)時(shí)熒光定量PCR？
2022-07-22 10:18:49
六種甲基化檢測方法【附視頻教程】
2022-05-16 17:09:40
DNA甲基化實(shí)驗(yàn)操作步驟
2022-05-13 11:52:54
?DNA甲基化實(shí)驗(yàn)介紹【科研小白】
2022-05-13 10:27:04
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)操作常見問題處理方法【干貨滿滿】
2022-04-08 16:34:54
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)操作常見問題答疑【附視頻教程】
2022-04-07 17:30:33
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)【附視頻教程】
2022-04-07 16:07:13
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)詳細(xì)操作步驟【附視頻教程】
2022-04-07 13:27:43
科研小白看的ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)簡介與原理【附視頻教程】
2022-04-06 16:01:15
高分文章都怎么研究m6A甲基化
2022-01-10 14:50:24
DNA甲基化提高癌細(xì)胞對EGFR抑制劑敏感性的原因
2021-10-27 00:29:41
高分文章研究RNA甲基化詳細(xì)步驟
2021-10-26 17:19:51
m6A甲基化研究思路設(shè)計(jì)方法
2021-10-26 15:44:54
Nature子刊 | DNA甲基化 甲基轉(zhuǎn)移酶異位靶向擬南芥中CG
2021-05-27 17:59:59
實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測步驟和注意事項(xiàng)【附視頻教程】
2021-04-26 21:06:57
甲基化檢測的幾種方法和實(shí)驗(yàn)流程【附視頻教程】
2021-04-23 11:19:00
細(xì)胞因子檢測方法怎么選？常用檢測方法優(yōu)缺點(diǎn)整理
2021-04-12 15:25:26
這是我見過的WB結(jié)果圖最多的文章！【文獻(xiàn)解讀】
2020-12-17 15:53:24
如何搞定Western Blot中的“奇葩”條帶【干貨文章】
2020-12-11 15:32:22
免疫沉淀及Pulldown這些方法原理你了解多少【新手入門】
2020-12-11 15:01:28
WB實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹【新手入門】
2020-12-11 14:59:38
實(shí)驗(yàn)介紹
【實(shí)驗(yàn)原理】
原核生物的rRNA堿基序列非常保守，而rRNA操縱子上編碼rRNA的DNA間隔區(qū)如16S和23S間隔區(qū)，各種生物種間的堿基序列差別很大。這個(gè)間隔區(qū)的 DNA序列及長度在 Mycoplasma 各個(gè)種間既有相對保守的部分，也有具有很大差異的部分。本制品是在編碼 16S 和 23S rRNA 的 DNA 上設(shè)計(jì)一對 F1/R1 引物，擴(kuò)增編碼 16S 和 23S rRNA 的 DNA 間隔區(qū)。此反應(yīng)體系只特異性擴(kuò)增 Mycoplasma DNA，檢出靈敏度與特異性都很高。
通過對支原體特定的序列設(shè)計(jì)引物，當(dāng)存在支原體污染時(shí)通過PCR特異性擴(kuò)增，會(huì)將目標(biāo)DNA特異性地復(fù)制，然后通過瓊脂糖電泳檢測，會(huì)跑出條帶出現(xiàn)陽性結(jié)果。反之當(dāng)沒有支原體污染時(shí)，由于沒有模板，PCR無法擴(kuò)增，則瓊脂糖電泳跑不出條帶，出現(xiàn)陰性結(jié)果。
【實(shí)驗(yàn)流程】
案例展示
3個(gè)樣本的支原體檢測，分別設(shè)置陽性對照Pc: Positive control,陰性對照Nc: Negative control，待測樣本1， 2， 3。
常見問題
1、取待檢樣本：
一般是接種后進(jìn)行 3-6d細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)上清液；
如果使用 Eagle 等常用的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)上清可直接加入到 PCR 反應(yīng)液中；
如果使用細(xì)胞懸濁液作為樣品，則需要提取 DNA，再進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。
2、一定要設(shè)置陽性對照（一般采用帶有支原體特異片段的質(zhì)粒）與陰性對照（H2O）；
3、配制PCR反應(yīng)體系時(shí)需在超凈工作臺(tái)里進(jìn)行，避免污染。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運(yùn)輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 動(dòng)物組織 | 單個(gè)樣品>0.1g，2mlEP管或凍存管裝，不要過量；樣本應(yīng)盡量新鮮，如不能立即提取蛋白或核酸，應(yīng)液氮速凍后凍存于-80℃或更低，凍存樣本避免反復(fù)凍融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標(biāo)記，且標(biāo)記清晰可識 |
| 種子樣本 | 去殼新鮮或保存于液氮中的的種子樣本，單個(gè)樣品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
| 貼壁/懸浮細(xì)胞 | 1. 總RNA或蛋白：106cell/指標(biāo)、漿/核RNA或蛋白：107cell/指標(biāo)、線粒體RNA或蛋白：2*107 cell/指標(biāo)，樣本盡量新鮮，細(xì)胞收取后直接加Trizol（QPCR檢測）或直接凍存于-80℃ 2. 若細(xì)胞處理（加藥、轉(zhuǎn)染、感染）后狀態(tài)差應(yīng)酌情加大收樣量 | -80℃ | 干冰 | |
| 全血/血清樣品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml； -80℃保存不超半周的白細(xì)胞勻漿>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
| 石蠟包埋樣品 | 由標(biāo)準(zhǔn)的石蠟包埋盒包埋的石蠟塊，有效厚度大于 0.1cm； 新鮮的 FFPE 組織切片，每片厚度不超過 10μm，2~8 張，表面積不超過 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 抗體 | 1. 按樣本種屬提供滿足相應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求的抗體； 2. 按抗體說明書要求寄送，盡量避免分裝；如分裝，確保量足夠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并提供抗體說明書。 3.保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識別此抗體的標(biāo)記，抗體的量應(yīng)大于實(shí)驗(yàn)所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 引物 | 干粉，≥1OD，如進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)基因至少提供兩對引物， 附帶公司引物合成單。 | -20℃ | 冰袋或常溫 |
電話：400-691-6686
在線時(shí)間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
湘公網(wǎng)安備